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磷脂酶C(PLC)試劑盒說明書

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更新日期:
2024-08-23
點擊次數:
1934
產品特點:
磷脂酶C(PLC)試劑盒說明書公司正在熱銷的產品:
132388-59-1芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-天冬胺凍切片組織RHO 表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
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  磷脂酶C(PLC)試劑盒說明書的詳細資料:

公司產品僅用于科研測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水149稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

產品名稱:磷脂酶CPLC)試劑盒說明書

規格:24樣、48樣、

貨號:GOY-016681

檢測方法:可見分光光度法、微板法

產品分類:脂肪酸系列

貯存溫度:28℃

本試劑盒保質期:6個月

圖片1.png 

【實驗前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復

溶液+1份去離子水)用于樣本的復溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

       :微孔板酶標儀450nm/630nm、旋轉蒸發儀/氮氣吹干裝

置、均質器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl100μl~1000μl、多道 250μl

           :乙腈、中性氧化鋁


3.png

 

選擇抗凝的注意點:

、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.40.5ml血漿);

、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

深紅沙雷氏菌3' DNA轉移標記試劑盒干擾γ(IFNγ)檢測試劑盒

金龜子綠僵菌RNA探針聚合標記試劑盒內皮1(EDN1)檢測試劑盒

短乳桿菌生物標記試劑專題生長激(GH)檢測試劑盒

發酵假絲酵母名稱瘦(LEP)檢測試劑盒

側毛殼3' DNA生物轉移標記試劑盒腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒

甲基桿菌屬3' DNA生物轉移標記鑒定試劑盒轉化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒

米根霉生物標記封閉溶液型膠原(COL3)檢測試劑盒

多球大洋螺菌去垢劑試劑專題白介10(IL10)檢測試劑盒

南方散斑殼名稱白介18(IL18)檢測試劑盒

釀酒酵母10% TWEEN 20溶液白介1β(IL1β)檢測試劑盒

乳片球菌95% TWEEN 20溶液白介2(IL2)檢測試劑盒

球孢鏈霉菌10%TWEEN 80溶液白介4(IL4)檢測試劑盒

異常漢遜酵母10%Triton X-100溶液白介6(IL6)檢測試劑盒

巴氏醋桿菌10%Triton X-114溶液白介8(IL8)檢測試劑盒

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枯草芽孢桿菌10%Brij-35促生長激釋放激(GHRH)檢測試劑盒

釀酒酵母10%Brij-58干擾γ(IFNγ)檢測試劑盒

立枯絲核菌10%辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷(Octyl-β-D-thioglucopyranoside)基質金屬9(MMP9)檢測試劑盒

韓國靈芝10%辛基糖苷(Octyl β-D-Glucoside)內皮1(EDN1)檢測試劑盒

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