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α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)試劑盒規格

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更新日期:
2024-08-19
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1789
產品特點:
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  α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)試劑盒規格的詳細資料:

產品名稱:α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)試劑盒規格

規格:24樣、48樣、

貨號:GOY-016575

檢測方法:可見分光光度法、微板法

產品分類:細胞壁代謝系列

公司產品僅用于科研貯存溫度:28℃

本試劑盒保質期:6個月

圖片1.png 

【實驗前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復

溶液+1份去離子水)用于樣本的復溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

       :微孔板酶標儀450nm/630nm、旋轉蒸發儀/氮氣吹干裝

置、均質器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl100μl~1000μl、多道 250μl

           :乙腈、中性氧化鋁


3.png

 

測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水149稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點:

、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.40.5ml血漿);

、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

TRBF1 (omeric repeat binding factor 1)  端粒體復制結合因子1抗原

TRIM32(tripartite motif protein 32)  TRIM32抗原

Trop-2/Tpm2 peptide  原肌球抗原

TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4)  生精凋亡相關基因4抗原

TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor)  惡性腫瘤特異性生長因子抗原

CIDEB peptide  CIDEB抗原

Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein)  Tsg101抗原

TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)  促甲狀腺受體抗原

MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3)  自噬微管相關輕鏈3抗原

TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1)  肺癌腫瘤阻抑基因1抗原

TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1)  甲狀腺核轉錄因子-1抗原

Tubulin- Gamma  微管抗原

TWIST protein peptide  TWIST抗原

T Beta10 peptide  β10抗原

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操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。


產品相關關鍵字: α-L-阿拉伯呋喃 α-L-Af 試劑盒
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