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Mg2+- ATP 酶試劑盒說明書

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更新日期:
2024-08-16
點擊次數(shù):
1445
產(chǎn)品特點:
Mg2+- ATP 酶試劑盒說明書公司正在熱銷的產(chǎn)品:
582-25-2苯甲鉀細胞CASPASE-2表達比色法定量檢測試劑盒
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH3細胞CASPASE-2表達熒光定量檢測試劑盒
2086-83-1標準品CASPASE-2表達西方雜交分析試劑盒
114977-28-5標準品CASPASE-2免疫共沉淀分析試劑盒
  Mg2+- ATP 酶試劑盒說明書的詳細資料:

公司產(chǎn)品僅用于科研測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水149稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

產(chǎn)品名稱:Mg2+- ATP 酶試劑盒說明書

規(guī)格:24樣、48樣、

貨號:GOY-016649

檢測方法:可見分光光度法、微板法

產(chǎn)品分類:呼吸代謝途徑系列

貯存溫度:28℃

本試劑盒保質(zhì)期:6個月

圖片1.png 

【實驗前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復

溶液+1份去離子水)用于樣本的復溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

       :微孔板酶標儀450nm/630nm、旋轉蒸發(fā)儀/氮氣吹干裝

置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl100μl~1000μl、多道 250μl

           :乙腈、中性氧化鋁


3.png

 

選擇抗凝的注意點:

、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.40.5ml血漿);

、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

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細菌β-半乳糖苷活性比色法定量檢測試劑盒20次載脂A1(APOA1)重組人內(nèi)皮1ET-1ELISA試劑盒,ET-1 ELISA

動物細胞β-半乳糖苷活性化學發(fā)光法定量檢測試劑盒20次載脂H(APOH)重組人低密度脂受體(VLDLRELISA試劑盒,VLDLR ELISA

動物細胞β-半乳糖苷活性比色法定量檢測試劑盒20次再生1(NEO1)重組人甘露聚糖結合凝集相關絲氨(MASPELISA試劑盒,MASP ELISA

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷活性化學發(fā)光法定量檢測試劑盒20次早期生長應答因子1(EGR1)重組人解整合樣金屬9ADAM9ELISA試劑盒,ADAM9 ELISA

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷活性比色法定量檢測試劑盒20次造骨鈣黏(CDHOB)重組人血管緊張受體Ⅰa型(AgtrⅠaELISA試劑盒,

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷活性濾膜染色試劑盒20次增殖關聯(lián)2G4(PA2G4)重組人肌抑(MSTNELISA試劑盒,

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動物組織β-半乳糖苷報告因活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑20次粘13(MUC13)重組人組織因子(TFELISA試劑盒,

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Mg2+- ATP 酶試劑盒說明書舒檢測試劑盒化酪氨激ATK抗體

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