實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

鈉 97%早期發育調控蛋白2抗體Borealin/CDCA8  分裂周期蛋白8抗體

鈉溶液 30 wt%溶液酯酶Cβ3Bone Sialoprotein/BSP  骨涎蛋白

氧化乙烯 98%血小板源性生長因子A抗體Bone sialoprotein  骨涎蛋白抗體

正丁鋰正己烷溶液 1.6M 己烷溶液（15%溶液）特異性核苷果糖β抗體Bone Alkaline Phosphatase/AKP2  骨堿性酶抗體

正丁鋰正己烷溶液 2.2M 己烷溶液（20%溶液）11號染色體開放閱讀框73抗體BOLA2  BOLA2蛋白抗體

叔丁鋰 1.3M戊烷溶液乙轉移酶A抗體BOLA1  BOLA1蛋白抗體

仲丁鋰 1.3M正己烷溶液前列環素受體抗體BOK/Bcl 2 like protein 9  Bcl2樣凋亡蛋白9抗體

二乙鋅 1.0 M in Hexane原鈣粘蛋白7抗體BOD1  雙向染色體分裂蛋白1抗體

乙鋰 1.6M 乙溶液過氧化物酶膜蛋白1抗體BOb-1/POU2AF1  B特異性轉錄因子抗體

鋰 1.6 M in diethyl ether橋粒斑菲素蛋白2抗體BNP/proBNP  腦納素前體抗體

鋰 1.5M 乙溶液胞粘蛋白結合調節蛋白抗體BNP/proBNP  腦納素前體抗體

鋰 1.7M in THF絲氨/蘇氨蛋白激酶PCTK2抗體BNP(H1G3)  人腦鈉素單克隆抗體

（硅烷）化鋰 0.56 M in hexanes二酯酶7抗體BNP  腦鈉素抗體

鋁 2.0 M 溶液二酯酶7B抗體BNP  腦鈉素/利鈉肽抗體

鋁 2.0 M 正己烷溶液先天性眼外肌纖維化相關蛋白FEOM2抗體BNP  腦鈉素/利鈉肽抗體
草酸含量試劑盒

化組蛋白去乙酰化酶7抗體SGC/FITC  熒光素標記可溶性糖蛋白C抗體IgG

組蛋白去乙酰化酶8抗體SGLT1 /FITC  熒光素標記鈉-葡萄糖共轉運載體1抗體IgG