感受態細胞是指能夠吸收外源DNA的細胞狀態，通常用于分子克隆、基因轉化及基因功能研究。不同的細菌對外源DNA的吸收能力有所不同，因此需要通過一系列的方法來使細胞處于感受態狀態。
一、制備方法
1、化學法：化學法是目前常用的制備
感受態細胞的方法，主要通過改變細胞的外部環境（如溫度、鹽濃度等）使細胞膜變得易于接受DNA。常見的化學法包括氯化鈣法和氯化鋰法。
2、電轉化法：電轉化法是利用電場對細胞膜進行短暫的電擊，使細胞膜局部發生破裂，從而形成膜孔，外源DNA通過這些孔道進入細胞。這種方法對大多數細菌和酵母具有較高的轉化效率，特別適用于一些對化學方法不敏感的細胞。操作時，細胞與外源DNA混合后置于電轉化儀中，施加一定強度的電場使其發生轉化。
3、熱激法：熱激法通過瞬時的溫度變化，改變細胞膜的流動性，使得細胞在較短時間內吸收外源DNA。常見的操作是將其與DNA混合后，經過一段時間的冰浴處理，再進行熱激2-5分鐘，最后立即轉回冰上。熱激法在一些大腸桿菌轉化中應用廣泛，且轉化效率較高。
二、優化技巧
1、培養條件的優化：細胞的生長狀態直接影響感受態細胞的制備效果。過度生長的細胞通常已經進入了穩定期，此時細胞膜的通透性較差，無法有效吸收外源DNA。因此，在制備時，應該在對數生長期進行處理，細胞密度控制在合適范圍。
2、冷卻和熱激的優化：在化學法制備時，冷卻和熱激的時間和溫度控制至關重要。冷卻時間太短，細胞膜無法改變其通透性；而熱激時間過長，細胞則容易死亡。因此，需要精確控制冷卻時間和熱激時間，以提高轉化效率。
3、鹽濃度的優化：鹽濃度對細胞的感受態狀態有重要影響。過高的鹽濃度可能導致細胞死亡，而過低的鹽濃度則無法有效改變細胞膜的通透性。常見的優化方法是通過調節氯化鈣或氯化鋰的濃度來達到最佳的轉化效果。
感受態細胞的制備方法多種多樣，其中化學法、電轉化法和熱激法是常用的技術。不同的細胞和實驗需求可能需要不同的優化策略，因此，在制備過程中需根據實際情況進行調整，以獲得最佳的轉化效率。通過合理優化細胞的生長狀態、冷卻和熱激的條件、鹽濃度、電轉化參數及細胞洗滌步驟等，可以顯著提高制備效率，為基因克隆、基因編輯等研究提供有力支持。
